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北京立博泰业科技有限公司

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所在地区:北京 北京
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手机号码:13911291885
公司官网:www.tech-up.cn
企业地址:北京市海淀区天秀路10号中国农大国际创业园3号楼5层5046
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北京立博泰业科技有限公司位于北京市海淀区中国农大国际创业园,是集高新技术研发和科研仪器研发销售为一体的高科技专业公司,是由具有多年高新技术研发和高新技术企业运营经验的专业人士创办。公司于2016年被认定为国家高新技术企业和中关村高新技术企业,公司以高新技术研发为己任,由多位博士和硕士组成研发团队,依......

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产品编号:1000000000013333873                    更新时间:2022-05-31
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北京立博泰业科技有限公司

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  • 主营业务:恒温快速扩增**盒,恒温荧光扩增仪
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RPA技术的基本原理

RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,反应温度在37°C左右。

重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。RPA扩增的基础体系(TwistAmp? Basic)含有DNA扩增所需的所有***,我们只要准备好引物和模板就行。扩增结果可以通过凝胶电泳进行终点检测,产物纯化后可用于下游研究。

在这个基础体系中添入不同的酶和探针,就可以实现多样化的RPA应用。举例来说,TwistAmp? exo结合了的exo探针技术和核酸外切酶III,能实现数据的实时读取,就像荧光定量PCR一样。不过反应终点的扩增子总量有所减少,适合获得强荧光信号进行动力学分析,不适合终点检测(比如跑胶)。将exo探针技术、核酸外切酶III和逆转录酶结合起来,可以一步实现RNA模板的实时扩增。




TwistDx***盒

我国主要的几种检测***盒都是基于RT-PCR原理。因为需要检测的病毒样本浓度有高有低,高的容易检测,nfo***盒价格,低浓度就会漏掉。所以PCR的方法就把病毒***扩增很多倍,达到可以检测出来的浓度。基本操作如下:

01  收集咽拭子等病毒样本,进口nfo***盒价格,通过***打碎保护病毒的蛋白质壳子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就没有了性,相对安全一些。

02  由于这次新冠是单链RNA病毒,所以要先转换成cDNA。这个可以类比像是视频文件,mp4,rmvb,进口nfo***盒价格,***i这些都是常见格式,同一个视频不同格式,意思都一样,可以互相转换。

03  常规PCR反应,加热到94℃把DNA拉链拉开,之后再55℃-60℃让引物,就是拉链扣分别套在两条拉链上,进口nfo***盒价格,再升温到72℃让拉链自己,用左拉链做模板造一个右拉链,用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环,RNA数量翻一倍。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的病毒这个时候也显现出来了。





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自 1983 年出现经典聚合酶链反应 (PCR) 方法以来,核酸扩增已渗透到生命科学的各个领域。 然而,尽管具有基本的影响,但 PCR 已被限制在实验室的范围内,因为它需要一套复杂的热循环系统,其限制了在资源匮乏环境中的外部应用。新的等温扩增策略正在寻求通过在恒温下提供核酸来突破传统的实验室限制。在这些方法中,重组酶聚合酶扩增 (RPA) 是发展快的方法之一,尽管它的开始相对较晚,但是却经历了快速的普及和市场化。





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