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重组酶介导等温核酸扩增技术原理

RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术（Recombinase Aided Amplification）的简称，是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下（佳温度37℃）进行核酸扩增的技术。具体原理为：重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA，进口Basic***盒价格，在与引物同源的序列处使双链DNA解旋，单链结合蛋白（SSB）防止单链DNA复性，在能量和dNTP存在的情况下，由DNA聚合酶完成链的延伸，5-20分钟就可实现仪器扩增。

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增加分子数量使核酸的处理和后续应用更容易，减少了使用***性探针来跟踪分子存在的需求，并在应用方面产生了巨大的创造力。然而，Basic***盒价格，尽管PCR很有价值 ，进口Basic***盒价格，但是其需要复杂的热循环仪来提供循环加热和冷却过程，这在很大程度上限制了 PCR 在实验室内的实现，阻碍了其在资源匮乏环境中的应用。

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PCR革新技术-英国TwistDx Inc公司开发恒温扩增RPA

英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被称为是可以替代PCR的核酸检测技术，目前新的等温扩增检测技术。以此为基础的TwistAmp? 核酸扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低，特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。

常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的适宜温度在37°C - 42°C之间，无需变性，在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要温控设备，RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。

据介绍，RPA检测的灵敏度很高，能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可以检出的水平，从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理，适用于无法提取核酸的实地检测。

RPA不仅可以对扩增产物进行终点检测，还可以对扩增过程进行实时监控，甚至可以通过试纸条(侧流层析试纸条LFD)读取结果。

目前，TwistAmp? ***盒的扩增子长度在500bp以内。不过，经过特别优化的RPA扩增，也可以生成更长的扩增产物，或者减慢扩增速度(便于定量)，甚至在更低的温度下进行反应。