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逆转录酶逆转录酶又称反转录酶,是一种RNA介导的DNA聚合酶,其反应过程中体现出三种功能为:以RNA作为模板合成互补DNA链 (complementary DNA, cDNA),形成RNA:cDNA杂交链;发挥RNase H活性,降解RNA:DNA杂交链中的RNA模板;以cDNA作为模板合成第二链DNA,形成双链DNA(如下图)。其中,RNaseH活性是逆转录酶的一个内在特性,可在合成过程中同时切割RNA:cDNA杂合链中的RNA模板,该特性可能降低逆转录效率,因此在实际应用中,常采用人工改造后的低或无RNase H活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有AMV和M-MLV,AMV分离自禽类成髓细胞瘤病毒(***ian Myeloblastosis Virus, AMV),M-MLV逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠病毒(Moloney Murine Leukemia Virus, MMLV),前者热稳定性优于后者,但AMV逆转录酶的RNaseH活性也更强,不利于长片段cDNA合成。市面上多使用经***工程改造过的M-MLV逆转录酶,其热稳定性改进,DNA型WLB8201KIT***盒报价,可在50℃左右工作,同时RNase H活性进一步减弱,提高了其逆转录效率。
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规范的ERA扩增***盒通过配置可在37℃-42℃的温度范畴内实际操作。过高的温度会对反映管理体系造成不好的危害,WLB8201KIT***盒报价,由于酶会慢慢地丧失所有活性。针对RT***盒,荧光型WLB8201KIT***盒报价,大家提议用户在40℃下运作反映,由于逆转录酶在稍高温度下具备更高的活性。 立博泰业——很多年市场销售恒温快速扩增***盒,企业坚持不懈用户为造物主,想用户之所感,急用户之所急,以诚为本,注重信誉度,以商品求发展趋势,RPAWLB8201KIT***盒报价,以品质谋发展,大家诚挚地热烈欢迎各位同仁协作共赢未来。
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TMA相关酶
依赖转录介导扩增(Transcription mediated amplification, TMA)的扩增模板为RNA或单链DNA,检测的扩增产物为RNA,详细原理可参考转录介导的核酸扩增技术小结。该体系所用酶有两种:M-MLV逆转录酶:用于模板RNA逆转录成DNA,并在逆转录过程中通过引物引入转录启动子序列,用于后续转录过程;T7 RNA聚合酶:以逆转录形成的DNA为模板,转录合成检测产物RNA。
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