




RPA的特性
1. 快速检测15min进行单分子检测试验
2.简易包装稳定冻干形式***
3. 无需热循环过程摆脱任何仪器束缚
4.便携设备要求低,贫瘠条件亦能完成检测
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TwistDx***盒
增加分子数量使核酸的处理和后续应用更容易,减少了使用***性探针来跟踪分子存在的需求,并在应用方面产生了巨大的创造力。然而,进口MILENIA02多少钱,尽管PCR很有价值 ,但是其需要复杂的热循环仪来提供循环加热和冷却过程,进口MILENIA02,这在很大程度上限制了 PCR 在实验室内的实现,阻碍了其在资源匮乏环境中的应用。
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TwistDx相关问题
1. RPA能实现多重化吗?
可以。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过,多重化的引物组合需要精心设计,以便每个引物都能同样有效的工作。需要注意的是,RPA反应的引物总量(nmol)尽量不要超标太多。如果在-一个反应中使用两个以上的扩增引物,就应该控制不同引物的量。另外,我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、设备以及荧光团的兼容性。
2.能否对模板进行定量?
可以。扩增子达到可检出水平的时间,依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多,扩增子就越快达到可检出水平。不过,这种定量需要精心的实验安排,确保对照反应是同时开始的。举例来说,可以利用镁离子的添加时间进行控制。因为镁离子一一旦进入体系,RPA反应就会开始。此外,较慢的扩增过程有助于更的定量。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。
3能否进行荧光终点分析?
可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光,荧光增强意味着发生了扩增。
4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?
支持。在RPA反应中,连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。
5跑胶前需要回收RPA产物吗?
需要。RPA反应中的物质会干扰琼脂糖电泳,如果不进行产物回收,跑出来的带会出现拖尾。
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