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RPA相关酶
重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是一种多酶协作的反应体系,详细原理可参考充满想象力的恒温扩增技术:RPA、RCA、SDA、HDA。该体系反应酶包含三种:重组酶:可与引物结合形成复合体,***至与引物同源的靶序列,RNA型WLB8201KIT***盒多少钱,促使引物与模板结合,同时帮助DNA解链,以便启动扩增;单链DNA结合蛋白:可与被置换出的DNA单链结合,稳定单链结构;DNA聚合酶:如Bsu DNA聚合酶,用于DNA链合成,WLB8201KIT***盒多少钱,同时具有链置换功能。对于RNA模板,需在反应中加入逆转录酶形成RT-RPA体系;若利用标记探针进行检测,还需加入核酸酶对探针序列进行切割,常用核酸酶有核酸内切酶 IV(Endonuclease IV, nfo)和核酸外切酶 III(Exonuclease III, exo),或者可与CRISPS/Cas系统搭配使用。
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如果在无模板对照中观察到假阳性结果,试纸条型WLB8201KIT***盒多少钱,则通常是由污染引起的。我们建议区分***配制区和扩增分析区。在使用任何扩增后打开反应管的终点检测方法时,RAAWLB8201KIT***盒多少钱,必须采用严格的污染控制措施。要排除或清除污染,我们建议用消毒液或 75%的酒精对工作区域进行消毒,并使用新的扩增***(溶解剂等)。可能需要重复几次清洁,才能完全清除污染。
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TMA相关酶
依赖转录介导扩增(Transcription mediated amplification, TMA)的扩增模板为RNA或单链DNA,检测的扩增产物为RNA,详细原理可参考转录介导的核酸扩增技术小结。该体系所用酶有两种:M-MLV逆转录酶:用于模板RNA逆转录成DNA,并在逆转录过程中通过引物引入转录启动子序列,用于后续转录过程;T7 RNA聚合酶:以逆转录形成的DNA为模板,转录合成检测产物RNA。
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