




大鼠脑缺血再灌注模型
造模方法
大鼠麻zui仰卧固定于恒温手术台上。暴露颈总动脉颈(CCA),分离颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA)。CCA近心端结扎并另备线,ICA远端放置微型动脉夹,在CCA靠近分叉处插入鱼线,即线栓由颈内动脉分叉处计长度为1.85±0.05cm,说明丝线头端己到达ICA分支MCA以和大脑前动脉(ACA)的分叉处,阻断了同侧ICA和经ACA来自对侧ICA的血供,缺血1h。
手术造模图片
病理判定图片
动物模型的设计原则
可靠性
的动物模型来应该力求可靠地反映人类疾病,即可特异地、可靠地反映某种疾病或某种机能、代谢、结构变化,应具备该种疾病的主要症状和体征,经化验或 X 照片、心电图、病理切片等证实。若易自发地出现某些相应病变的动物,就不应加以选用,易产生与疾病相混淆的疾病者也不宜选用。例如铅可用大白鼠做模型,但有缺点,因为它本身容易患动物地方性及进行性,后者容易铅所致的相混淆,不易确定该是铅所致还是它本身的疾病所致。用蒙古沙土鼠就比较容易确定,因为一般只有铅才会使它出现相应的变。
实验动物的采集方法
1. 大鼠、小鼠的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的Hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查,可将胸骨或股骨剪断,将其断面的挤在有稀释液的玻片上,混匀后涂片凉干即可染色检查。
2. 大动物的采集:狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到的距离,把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。
狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点。胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生。
实验动物的选择在此,提几点原则和方法。
第①,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此疾病的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用手术,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(STZ)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照《药理实验方法学》,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做手术造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除APoE基因的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,你非得要用SPF实验室,这也是不太实际的,也是没必要的。
