




PCR实验室布局
实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm,每20㎡一支40W的紫外灯。
PCR实验室工作基本原则
工作结束后,必须立即对工作区进行清洁。工作区的实验台表面应当可耐受诸如化学物质的消毒清洁作用。实验台表面的紫外照射应当方便有效。
实验材料、***、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从***准备区→样品制备区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流动。
PCR实验室各区功能及主要设备
***准备区:主要进行***的制备、分装和主反应混合液的制备。***和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。***原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的***。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。
扩增产物分析区:扩增产物的测定。本区主要设备加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
PCR实验室的设计原则
使用实时荧光PCR仪,扩增区、扩增产物分析区可合并;
采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
实验室的清洁应当按***贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
不同功能的工作区应是分隔***的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密相连,需安装物品传递窗。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,扩增前区与扩增后区应严格分开。
扩增区:主要进行DNA扩增。此外,已制备的DNA模板 (来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自***准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪、冰箱、离心机、加样器等。
PCR实验室通风系统及压力控制
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流***形式,严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
1.进入各工作区域应当严格按照单一方向进行
***储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。
2.各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域内的设备、物品不得混用。