




tang尿病模型
tang尿病构建
一般tang尿病模型构建的方法有:自发突变,饮食诱导,化学诱导,***诱导,转***/***敲除等。此方法为饮食诱导+化学***诱导,一般是用STZ加高脂高糖的膳食诱导来构建tang尿病模型模型。STZ即链脲佐菌素streptozocin简称,是一种小片状或者棱柱状结晶体,能溶于水。因其对一定种类的动物的胰岛β细胞有选择性***作用,能诱发许多动物的tang尿病,所以一般用它来构建糖tang尿病模型。
实验方法
Step1:用高脂肪高糖的膳食饲喂小鼠,诱导出胰岛素,持续约4-6周;
Step2:***STZ溶液:术前禁食12小时,之后进行给药处理;
Step3:一段时间以后取血,用血糖yi检测小鼠的禁食12h的血糖浓度;
Step4:血糖浓度≥16.7mmol/L时判断建模成功,称量体重。
多样硬化模型(EAE)
EAE模型可由来自髓鞘的蛋白如髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐剂(CFA)免yi诱导,mian疫当天及两天后腹腔***百ri咳毒su(PTX)而构建。髓磷脂特异性T细胞在外周被ji活,穿过血脑屏障进入zhong枢***系统并被重新ji活,引发一系列yan症反应,导致脱髓鞘和轴突细胞凋亡,***终导致***损伤和失去功能。使用标准化评分系统评估临床症状,衡量***的诱导发生程度。病理***染色切片 可见局部脱髓鞘和炎性白细胞浸润。百奥赛图利用自主开发制备的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A***,同时敲进人IL-17A***)为针对人IL-17A靶点的MSzhi疗yao效研究提供了一个可靠的MOG诱导的EAE模型。
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2 10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809 10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(Plt;0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(Plt;0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(Plt;0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(Plt;0.05)。
