




PCR实验室是分子诊断的基础,也是进行PCR实验的必备场所。近些年,分子诊断行业快速发展,对PCR的认识又进入到了一个新的阶段,但是基于实验室的基本知识仍然是非常重要的一环。
PCR实验室注意事项——标本制备区
由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染,可通过在本区内设立正压条件,避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
PCR实验室注意事项——扩增产物分析区
用过的吸头也必须放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理,如焚烧。由于本区有可能会用到某些可致***突变和***物质,故应当注意实验人员的安全防护。
PCR实验室各区功能及主要设备
***准备区:主要进行***的制备、分装和主反应混合液的制备。***和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。***原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的***。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。
扩增区:主要进行DNA扩增。此外,已制备的DNA模板 (来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自***准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪、冰箱、离心机、加样器等。
PCR实验室又叫***扩增实验,PCR是聚合酶链式反应简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA,可以看作生物体外的特殊DNA。通过DNA***追系统,能迅速掌握生物体内的病毒含量,其精准度高达纳米级别。
PCR实验室的设计原则
使用实时荧光PCR仪,扩增区、扩增产物分析区可合并;
采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
PCR实验室布局
不同功能的工作区应是分隔***的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密相连,需安装物品传递窗。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,扩增前区与扩增后区应严格分开。
PCR实验室通风系统及压力控制
各区域之间应具备单向的实验工艺流、物流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。
原则上应当设置4个区域:***储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。根据使用仪器的功能,区域可适当合并。
PCR实验室注意事项
***准备区、样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。PCR实验室没有严格的净化要求,可以根据用户的使用情况和资金的投入选择。
PCR实验室各区功能及主要设备
样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。