




PCR实验室的设计原则
使用实时荧光PCR仪,扩增区、扩增产物分析区可合并;
采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
PCR实验室工作基本原则
1.进入各工作区域应当严格按照单一方向进行
***储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。
2.各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域内的设备、物品不得混用。
PCR实验室注意事项——扩增产物分析区
核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法、直接或酶切后琼脂糖凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法、质谱分析等。
PCR实验室注意事项
***准备区、样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。PCR实验室没有严格的净化要求,可以根据用户的使用情况和资金的投入选择。
PCR实验室通风系统及压力控制
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流***形式,严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
各区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。
由于紫外照射的距离和能量对去污染的效果非常关键,因此可使用可移动紫外灯(254nm波长),在工作完成后调至实验台上60~90cm内照射。
PCR实验室注意事项——标本制备区
为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在***性的材料,必须在生物安全柜内开盖,并有明确的样本处理和灭活程序。
PCR实验室注意事项——扩增区
为避免气溶胶所致的污染,应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是,所有经过检测的反应管不得在此区域打开。
几个区域的大小设置情况,***准备区、扩增区、扩增产物分析区,空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一些。
不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出。
实验室的清洁应当按***贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。