MTT实验技术服务
MTT方法简介:
四甲基偶氮唑盐比色法(MTT方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有***存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡***的MTT还原成蓝紫色的针状甲瓒(Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜(DMSO)溶解,用酶联***检测仪在570nm波长处测定其吸光度OD值,OD值的高低可间接反映***的数量及其活性。
目前MTT法常用于以下几个方面的研究:
1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。
2、体外***敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,没有***性,目前广泛的用于临床前的******的筛选研究。
3、一些***活性的研究
基本实验步骤:
(1)将对数生长期细胞用胰酶消化后配制成浓度为1-10×104个/ml的细胞悬液,按1000-10000个细胞/孔接种于96孔板,每孔加100μl。
(2)将平板置37℃、5%CO2湿度培养箱中24小时后,加入含有不同浓度受试样本的培养液100μl,每个样本不同浓度设平行的三个孔,对照组加不含样本的培养液100μl,再放入培养箱中孵育24-72小时,
(3)用快速翻板法倒掉培养液,每孔加入用无***1640按5mg/ml新鲜配制的MTT溶液100μl,温育4小时,使MTT还原为甲瓒,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亚砜)200μl,用平板摇床摇匀后,使用***测定光密度值(OD)(检测波长570nm),以溶剂对照处理细胞为对照组,按下述公式计算化合物对细胞的***率,并按中效方程计算半数***浓度IC50。
客户方需提供:
样本描述,相关的实验设计内容如细胞类型,作用时间和样本浓度等。
实验周期与费用:
实验费用以样本数和细胞株的种类数目为单位计算,实验周期为20个工作日,公司将在材料和预付的实验经费全部到位的工作日后30个工作日之内提交实验结果。
Gensynthese Taq DNA Polymerase Taq Polymerase
Gene Synthesis DNA Synthese
Peptide Synthesis
***印迹 western blot 蛋白质印迹 病毒构建包装
详情请登入 http://.cn 或来电 021- 61990275
E-mail: lou800624@