20×EvaGreen荧光染料
EvaGreen 是一种用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBR Green I。除了有相似的光谱特性, EvaGreen有三个主要特点使它区别于SYBR Green I。
1.EvaGreen对PCR的***性远小于SYBR Green I,因此,使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。
2.EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号;较高浓度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析( HRM );该分析正被越来越多的用于PCR后的***分型和异源双链分析。由于SYBR Green I 对PCR的***性,从而要求其使用浓度必须很低,因此SYBR Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时,染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性,因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。
3.EvaGreen 的稳定性***。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被***。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。与之相反,SYBR Green I不稳定而且降解后对PCR***性更强。
编号 |
规格 |
售价¥
|
说明书*** |
RF024 |
100ul |
200.00 |
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10000×SYBR Green II RNA核酸染料 800.00/100ul
产品特性:
l 极高的灵敏度
在推荐浓度下使用时可以获得***强的 PCR 扩增信号。
l PCR***性***
智能化的“按要求释放” DNA 结合技术使得 EvaGreen 对 PCR 的***远小于 SYBR Green I 。
l 和快速 PCR 兼容
对 PCR 干扰***,从而极大的缩短了 PCR 延伸时间。
l 非常适合 HRM 分析
无“染料重分布”缺陷,兼容 PCR 后的高分辨率熔解曲线( HRM )分析。
l 兼容多重 PCR
在推荐浓度下使用时,无扩增子之间的染料迁移现象。
l ***稳定性
在大部分生化条件下非常稳定,可在室温下储存并可反复冻融。
l 安全性好
细胞膜穿透性测试表明,EvaGreen几乎不能穿透细胞膜,安全性高
l 优越的兼容性
和 SYBR GREEN I 光谱相似,和各知名品牌的 qPCR 仪器兼容。 用 EvaGreen 替代 SYBR Green 1 ,毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。
使用方法:
Reagent |
Quantity, for 50 μl of reaction mixture |
Final concentration
|
10X Ta***ffer(without MgCl2) | 10ul | 1X |
25mM MgCl2 | 4-5ul | 2.0-2.5mM |
10mM dNTP | 1ul | 0.2mM |
20ⅹEvaGreen | 1.25-2.5ul | 0.5X-1X |
PrimerI(25pmol/ul) | 1ul | 0.5pmol/ul |
PrimerI(25pmol/ul) | 1ul | 0.5pmol/ul |
Taq(5U/ul) | 0.4ul | 2U/50ul |
Template DNA | variable | 50 pg -1 μg |
ddH2O | Up to 50ul |
参考文献:
1. Mao, et al. Characterization of EvaGreen Dye and the implication of its physicochemical properties for qPCR applicati***. BMC Biotechnology 7, 76 (2007).
2. The Royal Society of Chemistry (2014), doi: 10.1039/c3an02334f