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北京诺博莱德科技有限公司

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北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen,Omega,Sigma,Invitrogen,Roche,Abcam,Santacruz,Fermantas(MBI),N......

BCA蛋白浓度测定***盒 NobleRyder P0030

产品编号:5764841                    更新时间:2014-05-16
价格: 来电议定

北京诺博莱德科技有限公司

  • 主营业务:产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测...
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产品详情

北京诺博莱德科技有限公司供应BCA蛋白浓度测定***盒 NobleRyder P0030量大优惠,欢迎来电咨询 电话:18911522826 13426053329 ***:1417971572 1215878164

 

BCA蛋白浓度测定***盒使用说明

***盒组成 包装(500微孔) 保存
 
BCA*** 100ml 2-8℃
Cu*** 3ml 2-8℃
PBS稀释液 30ml 2-8℃
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA) 1ml  -20℃
  
 本***盒自订购之日起一年内有效。本***盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔,如果是1ml比色皿时可做100孔。

产品简介

碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA***形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯***)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定***盒。

使用说明

一,微孔***法

1.         配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA***加1体积Cu***(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.         稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

3.         将样品作适当稀释(***好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.         各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用***测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

  

二,分光光度计法、

如没有***,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

步骤如下:

1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA***加1体积Cu***(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2,  稀释标准品:取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。

3,  取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入***。

离心管号 1 2 3 4 5 6 7(样品管1) 8(样品管2) 9(样品管3)
标准蛋白BSA 0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul适当稀释的样品1 200ul适当稀释的样品2 ……
PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0
BCA工作液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
4,  37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家***从事生化***、分子生物学***、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化***、分子***相关***、细胞培养及检测常用***、实验室常用耗材及仪器。

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