南京科捷分析仪器有限公司针对液相色谱仪保留值及色谱峰异常问题进行了归纳，同时对各问题的潜在解决方法进行罗列，希望能对液相色谱仪领域的相关工作人员提供帮助。
① 保留值异常
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现象 |
故障原因 |
解决措施 |
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保留时间改变 |
柱温变化 |
柱恒温，必要时需配置恒温箱 |
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等度与梯度间未能充分平衡 |
至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 |
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缓冲液容量不够 |
用＞25mmol/L的缓冲液 |
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柱污染 |
每天冲洗柱 |
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柱内条件变化 |
稳定进样条件，调节流动相 |
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柱快达到寿命 |
采用保护柱 |
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保留时间缩短 |
流速增加 |
检查泵，重新设定流程 |
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样品超载 |
降低样品量 |
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键合相流失 |
流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向 |
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流动相组成变化 |
防止流动相蒸发或沉淀 |
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温度增加 |
柱恒温 |
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保留时间 |
流速下降 |
管路***，更换泵密封性，排除泵内气泡 |
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硅胶柱上活性点变化 |
用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用碱致钝化柱 |
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键合相流失 |
同2） |
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流动相组成变化 |
同2） |
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温度降低 |
同2） |
② 色谱峰异常
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现象 |
故障原因 |
解决措施 |
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1）出现肩峰或分叉 |
样本体积过大 |
用流动相配样，总的样品体积小于***峰的15% |
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样本溶剂过强 |
采用较弱的样品溶剂 |
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柱塌陷或形成短路通道 |
更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件 |
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柱内烧结不锈钢失效 |
更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品 |
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进样器损坏 |
更换进样器转子 |
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2）鬼峰 |
进样阀残余峰 |
每次用后用强溶剂清洗阀 |
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样品中未知物 |
处理样品 |
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柱未平衡 |
重新平衡柱，用流动相作样品溶剂（尤其是离子对色谱） |
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三***（TFA）氧化（肽谱） |
每天新配，用***化剂 |
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水污染 |
通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水 |
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3）基线噪声 |
气泡（尖锐峰） |
流动相脱气，加柱后背压 |
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污染（随声噪声） |
清洗柱，净化样品，用HPLC级*** |
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检测器灯连续噪声 |
更换***灯 |
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电干扰 |
采用稳压电源，检查干扰的来源（如水浴等） |
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检测器中有气泡 |
流动相脱气，加柱后背压 |
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4）峰拖尾 |
柱超载 |
降低样品量，增加柱直径，采用较高容量 |
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峰干扰 |
清洁样品，调整流动相 |
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硅羟基作用 |
加三乙胺，用碱致钝化柱，增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相pH值，钝化样品 |
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死体积或驻外体积过大 |
对所有连接点作合适调整，尽可能采用细内径的连接管 |
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柱效下降 |
用较低腐蚀条件，更换柱，采用保护柱 |
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5）峰展宽 |
进样体积过大 |
降低样品量，增加柱直径，采用较高容量 |
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在进样阀中造成峰扩展 |
进样前后排除气泡以降低扩散 |
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数据系统采样速率太慢 |
设定速率应是每峰大于10点 |
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检测器时间常数过大 |
设定时间常数为感兴趣***峰半宽 |
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流动相粘度过高 |
增加柱温，采用低粘度流动相 |
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检测池体积过大 |
用小体积池，卸下热交换器 |
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保留时间过长 |
等度洗脱时增加溶剂强度，也可用梯度洗脱 |
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柱外体积过大 |
将连接管径和连接管长度降至***小 |
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样品过载 |
进小浓度小体积样品 |
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