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大豆PCR检测***盒荧光PCR简述

定义：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化，通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。

荧光PCR检测分为两种方法：荧光探针法和荧光染料法。

荧光PCR如何实现实时监控的呢？

PCR反应体系中加入荧光染料

所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分（检测器、激发光源、热循环模块）

在扩增过程中，PCR快速检测厂家，荧光信号随着PCR产物的增加而增强

PCR软件计算出数据，用于实验结果的分析

PCR检测***盒的优势：

优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

优势2：该系列***盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，PCR快速检测，凭借公司拥有的丰富的菌资源，每一种检测***盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

PCR检测***盒反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

1.引物3"端的碱基，特别是***末及倒数第二个碱基，PCR快速检测厂，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

2引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子很有好处。

3引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。