纯化线粒体ADP光谱法定量检测***盒实验开始前,制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用;同时将-20℃冰箱里的***融化,并预热氧电极仪到25℃。然后进行下列操作。
加入2.5毫升 介质液(Reagent A)到反应玻璃槽
使用微型磁力子搅拌,充分混匀
纯化线粒体ADP光谱法定量检测***盒密封反应槽
开始记录氧浓度:起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升(25℃)
持续记录1分钟后,***加入20微升待测的线粒体(总量2毫克)(注意:氧浓度可能瞬时变化)
纯化线粒体ADP光谱法定量检测***盒持续记录1分钟后,***加入20微升 底物液(Reagent B)(注意:氧浓度在10秒钟内开始下滑;参见注意事项9)
持续记录直至出现线性下行斜线出现拐点
继续***加入20微升 底物液(Reagent B)(注意:氧浓度在10秒钟内开始下滑)
纯化线粒体ADP光谱法定量检测***盒持续记录直至出现线性下行斜线出现拐点
测算氧浓度降低值(微摩尔/毫升):
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