大鼠ELISA***盒
(1) 抗原包被:用包被液将PEDV抗原作1∶5稀释包被反应板,每孔100μl,同时设阴性细胞培养物对照孔,置4℃过夜。
(2) 洗涤:用洗涤液洗涤2次,每次2min,沥干。
(3) 加入被检***:用保温液将被检***作1∶100稀释,加入反应板相邻的两个孔中,每孔100μl。同时作阴、阳性标准***对照,置37℃孵育1h。
(4) 洗涤3次:方法同上。
(5) 加入酶结合物:用保温液将酶结合物作1∶4 000稀释,加入反应孔中,每孔100μl,置37℃孵育1h。
(6) 洗涤3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔100μl,置室温暗盒内显色20min。
(8) 加入终止液:每孔50μl,静置5min。
(9) 测定OD值:用检测仪,于492nm波长,按仪器使用及制定标准要求调节仪器,测定各反应孔的OD值,记录结果。
1. 取出***盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。
2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 100ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 100ul 的蒸馏水;其余微孔中加入100ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 50ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
有关信息请见:http:///guyan-SonList-355242/
更多信息请见:http:///st97028/ml